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          產品中心

          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞大鼠關節(jié)軟骨細胞
          大鼠關節(jié)軟骨細胞

          產品簡介

          大鼠關節(jié)軟骨細胞的相關*:細胞PKCβ1激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          組織PKCβ1激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          細胞PKCβ2激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          組織PKCβ2激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          細胞PKCγ激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          組織PKCγ激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-21
          廠商性質:經銷商
          訪問量:329
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0999
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規(guī)格

          貨號

          大鼠關節(jié)軟骨細胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0999

          商品介紹:

          名稱    大鼠關節(jié)軟骨細胞   

          2.組織來源:關節(jié)軟骨組織

          3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠關節(jié)軟骨細胞分離自關節(jié)軟骨組織;關節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質上,上端朝向關節(jié)面,這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝。關節(jié)軟骨沒有神經支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中,關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動,使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內,這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的大鼠關節(jié)軟骨細胞采用膠原酶聯合中性蛋白酶消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的大鼠關節(jié)軟骨細胞型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-R092

          換液頻率每3-4天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態(tài)梭形、多角形

          傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          FGF7 基因全長ORF克隆

          FGF1 基因全長ORF克隆

          FGF21 基因全長ORF克隆

          IGF1 基因全長ORF克隆

          DPYS 基因全長ORF克隆

          NTRK2 基因全長ORF克隆

          ANGPT2 基因全長ORF克隆

          ANGPTL2 基因全長ORF克隆

          ANGPTL1 基因全長ORF克隆

          ANGPTL3 基因全長ORF克隆

          大鼠關節(jié)軟骨細胞0.78-50 ng/mL 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Protein AMBP

          HBI創(chuàng)傷弧菌生化鑒定條(GB) 英文名稱: 產品規(guī)格:5條/盒

          0.312-20 ng/mL ELISA試劑盒人TM4SF20蛋白

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Melanin-concentrating hormone receptor 1

          78-5000 pg/mL 人晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA試劑盒

          3.12-200 ng/mL 人熱休克蛋白10(Hsp10)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人閉合蛋白(Occludin)ELISA試劑盒

          15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Myosin-9

          78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human La-related protein 7

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