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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞大鼠心臟微血管周細胞
          大鼠心臟微血管周細胞

          產(chǎn)品簡介

          大鼠心臟微血管周細胞的相關(guān)*:小鼠總蛋白C(TPC)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
          小鼠總(TB)免疫試劑盒*直銷
          小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒進口、組裝
          小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒進口、分裝
          小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-21
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:332
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1325
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          產(chǎn)品屬性: 

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          大鼠心臟微血管周細胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1325

          商品介紹:

          名稱    大鼠心臟微血管周細胞 

          2.組織來源:心臟組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠心臟微血管周細胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明,心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的大鼠心臟微血管周細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          實驗室分離的大鼠心臟微血管周細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件PLL0.1mg/ml

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          產(chǎn)品貨號CM-R220

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態(tài)成纖維細胞樣

          傳代特性可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          大鼠 SIRP alpha / CD172a 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          大鼠 CLEC4D / CLECSF8 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          雪貂 IFNG / Interferon Gamma 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          小鼠 GM-CSF / CSF2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

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