產(chǎn)品簡(jiǎn)介

柯拉松血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

柯拉松血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
柯拉松血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基/Columbia-MUG Medium大腸桿菌的熒光檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

俄勒岡地鼠英文名稱：Oregon vole

木糖-明膠培養(yǎng)基發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠肝內(nèi)膽管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

Super-Bradford蛋白定量試劑盒200ml國(guó)產(chǎn)

QSG-7701(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PBST500ml國(guó)產(chǎn)gersion

M-NFS-60 (小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2

MFC-GFP(小鼠前胃細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2gersion

MRC-5(人胚肺成纖維細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2

柯拉松血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌phospho-Eg5(Tyr92)  磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體 0.1ml

SIGLEC14  唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體 0.2ml

CDC14B  細(xì)胞分裂周期蛋白14B抗體 0.2ml

phospho-p107(Thr369)   磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml

SKALP/Elafin  彈性蛋白酶抑制劑抗體 0.2ml

HRH4/GPCR105  組織胺H4受體抗體 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

phospho-VEGFR2 (Tyr1175)  磷酸化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體 0.1ml

ARSA  芳香基硫酸酯酶1抗體 0.2ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體 0.1ml

DCHS1  鈣粘蛋白19抗體 0.2ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。