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          總皂苷含量測試盒微量法

          產品簡介

          總皂苷含量測試盒微量法的相關產品:ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒γ氨基丁酸(GABA)測試盒丙酮酸羧化酶(PC)測試盒淀粉含量測試盒肝脂酶(HL)測試盒

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-03-03
          廠商性質:經銷商
          訪問量:504
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-SH455
          規格100管/96樣供貨周期現貨
          主要用途僅供科研研究實驗應用領域生物產業
          檢測方法微量法產品類別其它系列
          品牌谷研貨期現貨

          正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

          商品屬性:

          產品名稱

          總皂苷含量測試盒微量法

          規格

          100管/96樣

          檢測方法

          微量法

          貨號

          GOY-SH455

          產品分類

          其它系列

          用途

          僅供科研實驗


          總皂苷含量測試盒微量法

          測定意義:

          皂苷(Saponin)是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷,主要分布于陸地高等植物中,也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮靜、抗癌等有價值的生物活性。

          測定原理:

          使用超聲波提取樣品中的皂苷,利用香草-高氯酸顯色體系測定總皂苷含量。

          所需的儀器和用品:

          酶標儀、烘箱、水浴鍋、可調式移液器、96孔板、高氯酸、乙酸、超聲波清洗器

          試劑的組成和配制:

          提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

          提取液二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

          試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

          試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

          試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存;

          組織樣本的前處理:

          ①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

          ②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

          建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細菌或培養細胞的前處理先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

          測定步驟:

          1、 分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 340nm,蒸餾水調零。

          2、 樣本測定

          (1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

          (2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

          (3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

          A2,計算 ΔA=A1-A2。

          GAPDH 活性計算

          (1)按樣本蛋白濃度計算

          單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

          (2)按樣本鮮重計算

          單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

          (3)按細菌或細胞密度計算

          單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應體系總體積,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。

          生化檢測試劑盒實驗操作說明:

          一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

          包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。

          氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,特點是測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL。

          二、氧化系列生化檢測試劑盒

          包括*酶 (CAT) 活性分析、*(H2O2)檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

          蛋白質羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

          特點是:1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。


          總皂苷含量測試盒微量法


          三、抗逆系列生化檢測試劑盒

          包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

          超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,血漿,組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

          特點是:1.測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。

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