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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞
          大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

          產(chǎn)品簡介

          大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞PKG-Iα激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          組織PKG-Iα激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          細(xì)胞PKG-Iβ激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          組織PKG-Iβ激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          細(xì)胞PKG-II激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
          組織PKG-II激活性定量檢測試劑盒(A/B/C)

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-27
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:408
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1003
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1003

          商品介紹:

          名稱    大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞  

          2.組織來源:皮膚組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡介:

          大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,此類細(xì)胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,細(xì)胞核與細(xì)胞器*消失,細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機(jī)體尚有保護(hù)作用,故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞最終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質(zhì)層下方還可見到透明層。

          5.方法簡介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號CM-R094

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          傳代特性可傳1-2

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          食蟹猴 CD80 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 TNFSF13B 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 ATP1B3 / LOC716682 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 IL2RA 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 CD300LB 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 IFITM1 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 TLR8 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 TLR9 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 ENPEP 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 TLR3 基因全長ORF克隆

          大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人干擾素誘導(dǎo),雙激活蛋白激滯留RNA(EIF2AK2)ELISA試劑盒

          大腸菌群培養(yǎng)基(日本) 英文名稱:Coliform Medium(Japan) 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:7.5ml*20支/盒

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Myogenin

          15.6-1000 pg/mL 番茄特定基因序列PG)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 3

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Proteasome subunit beta type-9

          V-J瓊脂培養(yǎng)基(USP) 英文名稱:Vogeljohnson Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          GC瓊脂 英文名稱:GC Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          0.156-10 ng/mL 病毒H9亞型(AIV-H9)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

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