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          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞腎實質細胞
          腎實質細胞

          產品簡介

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          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-26
          廠商性質:經銷商
          訪問量:398
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0929
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規格

          貨號

          腎實質細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X0929

          商品介紹:

          名稱    腎實質細胞   

          2.組織來源:腎組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          腎實質細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法,然而這種方法受到供體腎短缺的限制。腎細胞移植可部分解決供體腎短缺的問題,是未來可以替代腎臟移植的*方法。因此,體外腎細胞的培養受到國內外有關專家的密切關注。原代腎細胞作為一種常用的腎臟毒理學研究對象,其分離方法主要有機械研磨分離法和酶消化法,酶消化法因對細胞損傷小、分離效果好而優于機械研磨分離法;目前常用的酶消化法主要是胰蛋白酶消化法和膠原酶消化法。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的人腎實質細胞采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的人腎實質細胞經檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-H066

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態成纖維細胞樣

          傳代特性可傳3代左右

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          甲型流感 H5N1 (A/duck/Laos/3295/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H5N1 (A/Japanese white-eye/Hong Kong/1038/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H1N1 (A/WSN/33) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

          腎實質細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Growth/differentiation factor 8

          氯溶液(20mg) 英文名稱: 產品規格:1ml*5

          0.156-10 ng/mL 人角蛋白Ⅱ型表皮細胞骨架2 (Keratin, type II cytoskeletal 2 epidermal)ELISA試劑盒

          氯化鈉結晶紫增菌液 英文名稱:Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth 產品規格:250g

          0.156-10 ng/mL  人細小病毒(B19)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sialin

          改良Frey添加劑 英文名稱: 產品規格:5ml*5支

          淀粉水解培養基 英文名稱:The Hydrolysis of Starch Medium 產品規格:250g

          皮膚癬菌鑒別瓊脂(DTM) 英文名稱:DTM Agar 產品規格:250g

          月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯LST管(雙料,含小倒管) 英文名稱:Lauryl Sulfate Tryptose Broth 產品規格:10ml/支*20

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