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          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞胎盤羊膜細胞
          胎盤羊膜細胞

          產品簡介

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          組織半

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-26
          廠商性質:經(jīng)銷商
          訪問量:328
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0877
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規(guī)格

          貨號

          胎盤羊膜細胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0877

          商品介紹:

          名稱    胎盤羊膜細胞   

          2.組織來源:胎盤組織

          3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          胎盤羊膜細胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯(lián)合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當?shù)莫毩⑿浴LケP還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內層,與眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的人胎盤羊膜細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的人胎盤羊膜細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件PLL0.1mg/ml

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-H050

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態(tài)梭形、多角形

          傳代特性可傳3代左右

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          小鼠 AGER 基因全長ORF克隆

          小鼠 RETN 基因全長ORF克隆

          小鼠 SCF 基因全長ORF克隆

          小鼠 CD209B 基因全長ORF克隆

          小鼠 CLU 基因全長ORF克隆

          小鼠 S100A4 基因全長ORF克隆

          小鼠 SIRT5 基因全長ORF克隆

          小鼠 EGF 基因全長ORF克隆

          小鼠 LDLR 基因全長ORF克隆

          小鼠 IL4I1 基因全長ORF克隆

          胎盤羊膜細胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor-related protein 5

          78-5000 pg/mL 蝦特定基因序列(FC)核酸檢測試劑盒

          0.625-40 ng/mL 人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒

          31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein L1

          0.156-10 ng/mL 人蛋硫氧化物還原B(MSRB)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人α血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(AHSP)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人轉化生長因子β受體1(TGFR-1)ELISA試劑盒

          31.2-2000 pg/mL 去(Noradrenaline) ELISA試劑盒

          0.78-50 ng/mL 人卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL 人真核翻譯起始因子2-α激3(EIF2AK3)ELISA試劑盒

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