Super Tube (狗腎細(xì)胞)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Super Tube (狗腎細(xì)胞)的相關(guān)*：細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
GSK-3BETA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
GSK-3BETA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
GSK-3BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
細(xì)胞PI-3 KINASE P110BETA

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-26

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：420

產(chǎn)品咨詢 15026555973

產(chǎn)品分類

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X0469
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
Super Tube (狗腎細(xì)胞)	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X0469

商品介紹：

名稱 Super Tube (狗腎細(xì)胞)

別稱MDCK supertube; SuperTube

種屬狗

年齡（性別）雌性，成年

組織來源正常腎

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細(xì)胞株MDCK，從中克隆建立了狗上皮樣細(xì)胞株Super Tube細(xì)胞。當(dāng)維持高細(xì)胞濃度時(shí)，Super Tube細(xì)胞形成大量的小管(據(jù)報(bào)道，24孔板的每孔鋪7×10^5細(xì)胞，3天內(nèi)就能形成小管)。要形成小管，Super Tube細(xì)胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。與原始細(xì)胞株相比，Super Tube細(xì)胞的c-AMP的檢測(cè)水平低得多，在毛喉素刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低；Super Tube細(xì)胞的跨上皮抗性也比Super Dome和MDCK都低。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM/F12＋0.05mM NEAA＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

PDXK 基因全長(zhǎng)ORF克隆

MAGEA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

AKR1E2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

VTA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

NMI 基因全長(zhǎng)ORF克隆

PPT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

PEX2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

TSPAN12 基因全長(zhǎng)ORF克隆

MAD2L1BP 基因全長(zhǎng)ORF克隆

GNPDA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

Super Tube (狗腎細(xì)胞)氯、碘中和劑管（帶棉簽） 10ml*20

2 ug pAd/PL-DEST（骨架載體） pAd/PL-DEST（骨架載體）低溫運(yùn)輸，-20℃保存

SPYE肉湯 SPYE Broth 100g

600U 等離子體胺氧化 Plasma Amine Oxidase -20℃保存

10mL TBE Urea Sample Buffer,2X TBE Urea Sample Buffer,2X 常溫保存

20次一站式His標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝(超聲破碎細(xì)胞) One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack 介質(zhì)請(qǐng)于20%乙醇中4℃保存，PMSF于-20℃保存，其余試劑4℃放置

2 ug pSUPER.puro pSUPER.puro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

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