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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞細胞系293T HEK-293T(胚腎細胞)
          293T HEK-293T(胚腎細胞)

          產(chǎn)品簡介

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          規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
          81740-0

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-26
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:458
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0005
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          293T [HEK-293T](胚腎細胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0005

          商品介紹:

          名稱    293T [HEK-293T](胚腎細胞)    

          別稱Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo

          種屬人類

          年齡(性別)胎兒

          組織來源胚胎腎

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          背景描述293T細胞是293 [HEK-293]細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:3-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~24-30小時

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO25%

          溫度:37℃

          注意事項該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為正常現(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          肉瘤抗原1(SAGE1)免疫試劑盒進口、組裝

          基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒*直銷

          抗甘氨酰tRNA合成(GARS)抗體免疫試劑盒進口、組裝

          去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)免疫試劑盒*直銷

          抗核周因子(APF)抗體免疫試劑盒*直銷

          磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)免疫試劑盒*直銷

          小鼠肝細胞生長因子(HGF)免疫試劑盒進口、組裝

          羥賴(Hyl)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

          肌抑素(MSTN)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

          多聚腺苷二核糖聚合(PARP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

          293T [HEK-293T](胚腎細胞) 2 ug pcDNA3.1/Zeo(-) pcDNA3.1/Zeo(-) 低溫運輸,-20℃保存

          YPDA培養(yǎng)基 YPDA Medium 250g

          1瓶 VCAP細胞株 VCAP 低溫運輸和保存

          50T 牛PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

          100 mg Congo Red  Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

          500mL Blotto in PBS with azide  Blotto in PBS with azide  常溫保存

          1g 彩色Acryl助沉劑 Color Acryl DNADOWN 4℃保存

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