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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系MCF 7B (乳腺癌細(xì)胞)
          MCF 7B (乳腺癌細(xì)胞)

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          MCF 7B (乳腺癌細(xì)胞)的相關(guān)*:細(xì)胞P21蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50次
          細(xì)胞P21蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50次
          P21蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
          P21蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
          P21蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
          細(xì)胞P27蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-25
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:377
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X0377
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

          QQ截圖20210907103850.png

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號(hào)

           MCF 7B (乳腺癌細(xì)胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0377

          商品介紹:

          名稱    MCF 7B (乳腺癌細(xì)胞)   

          別稱MCF-7B

          年齡(性別)69

          生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          背景描述MCF 7B細(xì)胞為MCF-7細(xì)胞的一個(gè)亞克隆,表達(dá)高水平的褪黑素MT1受體mRNAMCF 7B細(xì)胞為MCF-7細(xì)胞的一個(gè)亞克隆,表達(dá)高水平的褪黑素MT1受體mRNAMCF 7B細(xì)胞對(duì)褪黑素有一定的敏感性。

          生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:3-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO25%

          溫度:37℃

           

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           GALNT9 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           RAB11B 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           RNASE3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           GML 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           LCN8 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           RNASE12 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           LALBA 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           AHSA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           HIST2H2AA4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

           AKR1CL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          MCF 7B (乳腺癌細(xì)胞)100g L- 谷 L-Glutamic Acid 室溫密封保存

          MC培養(yǎng)基(不含瓊脂)  250g

          0.1mg 山羊抗兔IgG,熒光素488標(biāo)記 Goat Anti-Rabbit IgG ,IF488 Conjugate  4℃保存

          2 ug pBKS pBKS 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          100mL DNEDTA溶液,0.5M,PH8.01   

          2 ug pFastBac-Dual pFastBac-Dual 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(顆粒)  250g

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