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          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞脈絡膜血管內皮細胞
          脈絡膜血管內皮細胞

          產品簡介

          脈絡膜血管內皮細胞的相關*:細胞PCTA1RE1激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
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          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-25
          廠商性質:經銷商
          訪問量:351
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0997
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          產品屬性: 

          產品名稱

          規(guī)格

          貨號

          脈絡膜血管內皮細胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0997

          商品介紹:

          名稱    脈絡膜血管內皮細胞 

          2.組織來源:脈絡膜組織

          3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          脈絡膜血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視神經乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網膜之間,續(xù)連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用,對整個視覺神經有調節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養(yǎng)和遮光作用。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的人脈絡膜血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的人脈絡膜血管內皮細胞CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          產品貨號CM-H092

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態(tài)內皮細胞樣

          傳代特性可傳2-3

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          CXCL16 基因全長ORF克隆

          FGF18 基因全長ORF克隆

          CCL25 基因全長ORF克隆

          CXCL13 基因全長ORF克隆

          CCL26 基因全長ORF克隆

          CXCL12 基因全長ORF克隆

          GDF9 基因全長ORF克隆

          PDGFB 基因全長ORF克隆

          PDGFA 基因全長ORF克隆

          BMPR1A 基因全長ORF克隆

          脈絡膜血管內皮細胞0.156-10 ng/mL 人醛脫氫(Aldehyde oxidase)ELISA試劑盒

          1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Protein disulfide-isomerase A4

          3.12-200 ng/mL ELISA Kit for Human Cell division control protein 42 homolog

          78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Growth arrest-specific protein 1

          15.6-1000 pg/ml 人白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Insulin-degrading enzyme

          93.75-6000 pg/mL 人原2(F2)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Major vault protein

          78-5000 pg/mL 人重復序列包含蛋白2(BIRC2)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Extracellular matrix protein 1

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