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          DC細胞

          產品簡介

          DC細胞的相關*:小鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒現貨供應
          小鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP2/Gel A)抗體免疫試劑盒*直銷
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          小鼠基質金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒進口、分裝
          小鼠基質金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒現貨供應

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-21
          廠商性質:經銷商
          訪問量:456
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          品牌其他品牌貨號GOY-01X1429
          規格1×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規格

          貨號

          DC細胞

          1×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X1429

          商品介紹:

          名稱    DC細胞   

          DC細胞抗腫瘤機制如下:

          a)DC可以高表達MHC-Ⅰ類和MHC-Ⅱ類分子,MHC分子與其捕獲加工的腫瘤抗原結合,形成肽-MHC分子復合物,并遞呈給T細胞,從而啟動MHC-I類限制性CTL反應和MHC-Ⅱ類限制性的CD4+Thl反應。同時,DC還通過其高表達的共刺激分子(CD80/B7-1CD86/B7-2CD40)提供T細胞活化所必須的第二信號,啟動了免疫應答。

          b)DCT細胞結合可大量分泌IL-12IL-18激活T細胞增殖,誘導CTL生成,主導Th1型免疫應答,利于腫瘤清除;激活穿孔素P顆粒酶BFasL/Fas介導的途徑增強NK細胞毒作用;

          c)DC分泌趨化因子(Chemotactic CytokinesCCK)專一趨化初始型T細胞促進T細胞聚集,增強了T細胞的激發。保持效應T細胞在腫瘤部位長期存在,可能通過釋放某些抗血管生成物質(IL-12IFN-γ)及前血管生成因子而影響腫瘤血管的形成。上述CCK進一步以正反饋旁分泌的方式活化DC,上調IL-12CD80CD86的表達;同時DC也直接向CD8+T細胞呈遞抗原肽,在活化的CD4+T細胞輔助下使CD8+T細胞活化,CD4+CD8+T細胞還可以進一步通過分泌細胞因子或直接殺傷,增強機體抗腫瘤免疫應答。

          DC刺激免疫反應有以下特點:

          1.樹突狀細胞(DC)是人體內功能*的專職抗原遞呈細胞,DC相當于信使,將抗原信息傳遞給T細胞,并具有活化T細胞的功能,很少量就可以激發強大的T細胞反應。

          2.可致敏輔助T細胞的多種細胞因子,顯著刺激初始型T細胞增殖,以激活體內靜止狀態的初始型T細胞(而巨噬細胞、B細胞僅能刺激已活化的或記憶性T細胞)。

          3.幫助重建腫瘤患者對腫瘤細胞的免疫監視功能。機體的免疫系統具有完備的監視功能,但腫瘤細胞對機體的免疫系統有抵抗和抑制作用,使得免疫細胞不能識別和殺傷腫瘤細胞。在DC疫苗培養中用腫瘤抗原誘導DC使其致敏后,可將其抗原信息傳遞給T細胞,使T細胞重新識別和殺傷腫瘤細胞。

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           EPHB1 / EPHT2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           SORCS1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           KLK-8 / Kallikrein-8 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          小鼠 CD32 / FCGR2B 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          小鼠 CD64 / FCGR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           CD32b / FCGR2B 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          小鼠 CD16-2 / FCGR4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 CD32a / FCGR2A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          DC細胞分裂周期37樣蛋白1抗體Human CMLC-1(Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒,

          羧肽X(M14家族1)抗體Human c-myc(c-myc Oncogene Product) ELISA Kit人球蛋白j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒,

          卷曲螺旋結構域蛋白135抗體Human CNR1(Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒,

          跨膜結構域邊緣蛋白CEE抗體Human CNTNAP2(Contactin Associated Protein Like Protein 2) ELISA Kit小鼠多巴D1受體(D1R)ELISA試劑盒,

          分子伴侶CESK1蛋白抗體Human CNTN4(Contactin 4) ELISA Kit大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒,

          卷曲螺旋結構域蛋白124抗體Human CNX(Calnexin) ELISA Kit大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒,

          CDK5激活結合蛋白1抗體Human COL11α1(Collagen Type XI Alpha 1) ELISA Kit大鼠生長(GH)ELISA試劑盒,

          化表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體Human COL13(Collagen Type XIII) ELISA Kit大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒,

           

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