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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞小鼠外周血單核細胞
          小鼠外周血單核細胞

          產(chǎn)品簡介

          小鼠外周血單核細胞的相關(guān)*:細胞HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒定性檢測試劑盒 20次
          組織HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒定性檢測試劑盒 20次
          體液HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒定性檢測試劑盒 20次
          通用型HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒 20次
          細胞HCV(HEPATITIS VIRUS

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-20
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:348
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1255
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          產(chǎn)品屬性: 小鼠外周血單核細胞

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號


          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1255

          商品介紹:

          名稱    小鼠外周血單核細胞 

          2.組織來源:外周血

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          小鼠外周血單核細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較,單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細胞體積繼續(xù)增大,直徑可達50-80μm,細胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,參與機體防衛(wèi)機制,還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,并包圍異物。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的小鼠外周血單核細胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          實驗室分離的小鼠外周血單核細胞經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號CM-M191

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態(tài)巨噬細胞樣

          傳代特性不增殖;不傳代

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           NMNAT2 / NMNAT-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           EGFL6 / EGF-L6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 Protein (aa 1-725) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          小鼠外周血單核細胞化核苷酸交換因子VAV3抗體Anti-MCU Antibody口腔角質(zhì)生長因子5mL規(guī)格

          囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體Anti-MCM7 Antibody(原貨號PB0260)親和層析柱12 mL規(guī)格

          癌基因VAV2抗體Anti-MDM2 Antibody鎳柱介質(zhì)10mL規(guī)格

          囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白BAnti-MDM4 Antibody抗Ⅲ,10mg/mL1mL圖片

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