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          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞大鼠胰腺上皮細胞
          大鼠胰腺上皮細胞

          產品簡介

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          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-19
          廠商性質:經銷商
          訪問量:368
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0771
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規格

          貨號

          大鼠胰腺上皮細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X0771

          商品介紹:

          名稱    大鼠胰腺上皮細胞   

          2.組織來源:胰腺組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠胰腺上皮細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制αβ細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細胞在發育上被認為分離自內胚層胰腺上皮,在隨后的胰腺發育過程中,胰腺干細胞分化為胰島細胞(αβδPP細胞)、導管上皮細胞以及腺泡細胞。胰腺組織中還存在大量的間充質來源的細胞,包括成纖維細胞、血管內皮細胞、血管平滑肌細胞以及星形細胞,其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質來源的細胞,尤其是成纖維細胞。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、胰蛋白酶消化以及膠原酶消化法等,胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發生具有重大意義。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的大鼠胰腺上皮細胞采用膠原酶分次消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的大鼠胰腺上皮細胞Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-R021

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態上皮細胞樣

          傳代特性可傳1-2

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           KLKB1 基因全長ORF克隆

           ROBO2 轉錄變體2 基因全長ORF克隆

           SerpinA5 基因全長ORF克隆

           SerpinA4 基因全長ORF克隆

           SerpinA3 基因全長ORF克隆

           SerpinA1 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

           CDH3 / CDHP 基因全長ORF克隆

           PTP1B / PTPN1 基因全長ORF克隆

           PODN / Podocan 基因全長ORF克隆

           F11 / FXI 基因全長ORF克隆

          大鼠胰腺上皮細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human 4F2 cell-surface antigen heavy chain

          0.156-10 ng/mL 人熱休克蛋白40(HSP40)ELISA試劑盒

          78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human R-spondin-1

          15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Promotilin

          0.312-20 ng/mL 人氧化亞基1(COX1)ELISA試劑盒

          硝酸鹽肉湯 英文名稱:Nitrate Broth 產品規格:250g

          Voges-Proskauer(V-P)試劑盒 英文名稱:Voges-Proskauer(V-P) reagent box 產品規格:5ml*4

          PBS-Tween20洗液 英文名稱:PBS-Tween20 lotion 產品規格:250g

          78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Kinase suppressor of Ras 2

          CVT瓊脂 英文名稱:CVT Agar 產品規格:250g

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