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          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞大鼠卵巢成纖維細胞
          大鼠卵巢成纖維細胞

          產品簡介

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          細乳酸脫氫(L

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-19
          廠商性質:經銷商
          訪問量:391
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0899
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規格

          貨號

          大鼠卵巢成纖維細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X0899

          商品介紹:

          名稱    大鼠卵巢成纖維細胞   

          2.組織來源:卵巢組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠卵巢成纖維細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細胞大多分布于卵巢表面,其主要特點和功能:成纖維細胞在體外易于培養;卵巢損傷后,成纖維細胞能修復和重塑卵巢;能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴散。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的大鼠卵巢成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的大鼠卵巢成纖維細胞Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-R055

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態成纖維細胞樣

          傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          小鼠 MCPT1 基因全長ORF克隆

          小鼠 PILRB1 基因全長ORF克隆

          小鼠 CD10 / MME 基因全長ORF克隆

          小鼠 IL7 基因全長ORF克隆

          小鼠 Integrin alpha9 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

          小鼠 PSMA / FOLH1 基因全長ORF克隆

          小鼠 IL36RN / IL1F5 基因全長ORF克隆

          小鼠 LTB / TNFSF3 基因全長ORF克隆

          小鼠 Integrin alpha8 基因全長ORF克隆

          小鼠 NPNT 基因全長ORF克隆

          大鼠卵巢成纖維細胞葡萄糖酸鹽-雙岐桿菌鑒定 英文名稱: 產品規格:20支

          31.2-2000 pg/mL 人線粒體琥珀酸鹽半醛脫氫(SSADH)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL 人膜裂解抑制物(MIRL/CD59)ELISA試劑盒

          31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human CK II alpha'

          15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human T-lymphocyte activation antigen CD86

          0.78-50 ng/ml ELISA Kit for Human Breast cancer type 1 susceptibility protein

          31.2-2000 pg/mL 人血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒

          78-5000 pg/mL 植物源性成分(RBCL)核酸檢測試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人可溶性糖蛋白130(sgp130/sCD130)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人Ladinin蛋白1(Lad-1)ELISA試劑盒

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