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          產品中心

          當前位置:首頁產品中心科研細胞細胞系L-WRN(小鼠皮下結締組織細胞)
          L-WRN(小鼠皮下結締組織細胞)

          產品簡介

          L-WRN(小鼠皮下結締組織細胞)的相關*:蛋白電泳2倍樣品處理液 10毫升
          蛋白電泳10倍濃縮運行緩沖液 500毫升
          40%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液 500毫升
          40%ACRYLAMIDE-BIS(29:1)溶液 500毫升
          40%ACRYLAMIDE-BIS(37.5:1)溶液 500毫升
          30%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液 500毫升

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-18
          廠商性質:經銷商
          訪問量:512
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0641
          規格1×10?cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規格

          貨號

          L-WRN(小鼠皮下結締組織細胞)

          1×10?cells/T25培養瓶

          GOY-01X0641

          商品介紹:

          名稱    L-WRN(小鼠皮下結締組織細胞)   

          年齡(性別)100 days

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態成纖維細胞樣

          背景描述L-WRN細胞通過R-spondin 3noggin共表達載體轉染L-Wnt3A 獲得,并在含有G418和濕霉素b的培養基中選擇穩定克隆。

          生物安全等級2

          生長培養基DMEM10% FBS(164210-50)+0.5 mg/mL G-418+0.5 mg/mL hygromycin B1% P/S

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養條件

          氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           ACTN3 基因全長ORF克隆

           ITGA3 基因全長ORF克隆

           Integrin alpha8 基因全長ORF克隆

           SOSTDC1 基因全長ORF克隆

           ME2 基因全長ORF克隆

           FTO 基因全長ORF克隆

           MUC1 轉錄變體2 基因全長ORF克隆

           ITGAX 基因全長ORF克隆

           ITGA4 基因全長ORF克隆

           CLEC3B 基因全長ORF克隆

          L-WRN(小鼠皮下結締組織細胞)31.2-2000 pg/mL 人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒

          2.5-160 ng/mL ELISA Kit for Human Atrial natriuretic peptide receptor 2

          78-5000 pg/mL 轉基因植物PRSV基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

          0.78-50 ng/mL 人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sphingosine 1-phosphate receptor 1

          0.312-20 ng/mL 人凝血因子Ⅺ(F11)ELISA試劑盒

          15.6-1000 pg/mL 大豆特定基因序列(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

          RV沙門菌增菌液體培養基(2015藥典)(顆粒) 英文名稱: 產品規格:250g

          62.5-4000 pg/mL 人C1q TNF相關蛋白-1(CTRP1/C1QTNF1)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL 人高遷移率族蛋白B2(HMGB2)ELISA試劑盒

           

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