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          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞大鼠胰腺星狀細胞
          大鼠胰腺星狀細胞

          產品簡介

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          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-18
          廠商性質:經銷商
          訪問量:320
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0751
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產品屬性:  

          產品名稱

          規格

          貨號

          大鼠胰腺星狀細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X0751

          商品介紹:

          名稱    大鼠胰腺星狀細胞  

          2.組織來源:胰腺組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制αβ細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應細胞,PSC分離和成功培養是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達Desmin蛋白,活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態與激活態兩種,并分別具有特異的標志物。靜息狀態PSC胞質內富含的脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達Desmin。激活狀態PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發現,原代分離的細胞培養6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示,細胞接種24h仍然表達Desmin48hDesmin基本不再表達。培養48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA,隨著培養時間的增長和傳代次數的增加,細胞表達alpha-SMA,而不再表達Desmin,說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養第6d大多數細胞激活,傳代后細胞處于高度激活狀態。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,目前研究發現:胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,導致細胞形態、功能發生變化,促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規則沉積。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的大鼠胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的大鼠胰腺星狀細胞α-SMADesmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-R016

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態成纖維細胞樣

          傳代特性可傳2-3

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           KNG1 / BDK 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

           PAPPA2 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

           CD208 基因全長ORF克隆

           LBP 基因全長ORF克隆

           RPGR 轉錄變體A 基因全長ORF克隆

           Semaphorin 3E 基因全長ORF克隆

           SPG3A 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

           SPG21 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

           SSSCA1 基因全長ORF克隆

           FANCL 基因全長ORF克隆

          大鼠胰腺星狀細胞0.156-10 ng/mL 人腸血管活性肽受體2 ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Type III iodothyronine deiodinase

          0.156-10 ng/mL 人生長停滯特異性蛋白6(GAS-6)ELISA試劑盒

          麥康凱瓊脂(含結晶紫) 英文名稱: 產品規格:250g

          15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 2

          0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Very low-density lipoprotein receptor

          豬膽粉 英文名稱: 產品規格:250g

          78-5000 pg/mL 人卵固蛋白同族物2(Ovostatin homolog 2)ELISA試劑盒

          BBL瓊脂培養基 英文名稱:BBL Agar Medium 產品規格:250g

          腸道菌增菌肉湯(EE) 英文名稱:Enterobacteria Enrichment Broth 產品規格:250g

           


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