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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞小鼠骨骼肌細胞
          小鼠骨骼肌細胞

          產(chǎn)品簡介

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          組織AURORA-B激活性定量檢測試劑盒

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-16
          廠商性質:經(jīng)銷商
          訪問量:375
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0977
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:   

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          小鼠骨骼肌細胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0977

          商品介紹:

          名稱    小鼠骨骼肌細胞   

          2.組織來源:骨骼肌組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          小鼠骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結構和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方,細胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的小鼠骨骼肌細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的小鼠骨骼肌細胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件PLL0.1mg/ml

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號CM-M084

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態(tài)成纖維細胞樣

          傳代特性可傳3-5代左右

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          大鼠 PIN4 / LOC684441 基因全長ORF克隆

          大鼠 VWA9 基因全長ORF克隆

          大鼠 DRG2 基因全長ORF克隆

          大鼠 POMP 基因全長ORF克隆

          大鼠 CASP14 基因全長ORF克隆

          大鼠 NDRG3 基因全長ORF克隆

          大鼠 STIP1 基因全長ORF克隆

          大鼠 STXBP3 基因全長ORF克隆

          大鼠 IDH3A 基因全長ORF克隆

          大鼠 PSAP 基因全長ORF克隆

          小鼠骨骼肌細胞31.2-2000 pg/mL 人Toll/白介素1受體域包含銜接蛋白(TIRAP)ELISA試劑盒

          78-5000 pg/mL 金黃菌(SA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

          0.156-10 ng/mL 人Dickkopf樣蛋白1(Dickkopf-like protein 1)ELISA試劑盒

          腸道菌計數(shù)瓊脂(VRBDA) 英文名稱:Violet Red Bile Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Leucine-rich repeat serine/threonine-protein kinase 2

          木糖-明膠培養(yǎng)基 英文名稱:Xylose - gelatin medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Cystatin-9

          0.78-50 ng/mL 人促腎上腺皮質激素釋放因子受體1(CRF-R1)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人β-防御素126(β-DF126)ELISA試劑盒

          嗜鹽性試驗用胰胨水 英文名稱:Halophilic experimental medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

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